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        爺爺?shù)拇竽⒐骄x(九篇)
        
					
        
						
					
        
				
        
				 
         
        前言：一篇好文章的誕生，需要你不斷地搜集資料、整理思路，本站小編為你收集了豐富的爺爺?shù)拇竽⒐街黝}范文，僅供參考，歡迎閱讀并收藏。
         
        爺爺?shù)拇竽⒐? /></p> <h2>第1篇：爺爺?shù)拇竽⒐椒段?/h2> <p> 就業(yè)導(dǎo)向</p> <p> 競爭能力培養(yǎng)</p> <p> 論文摘要：當(dāng)今的高等教育已經(jīng)逐漸演變?yōu)橐环N大眾教育。招生數(shù)量的逐年增加，給高校帶來機遇和挑戰(zhàn)的同時，隨之而來的還有沉重的就業(yè)壓力。為應(yīng)對這種嚴(yán)峻的態(tài)勢，內(nèi)蒙古工業(yè)大學(xué)國際商學(xué)院以就業(yè)為導(dǎo)向，把畢業(yè)實習(xí)與就業(yè)相結(jié)合，嘗試探索出一條新出路。而參與企業(yè)生產(chǎn)實習(xí)本身就是培養(yǎng)大學(xué)生綜合能力的一種行之有效的實踐教學(xué)方式。基于就業(yè)導(dǎo)向的畢業(yè)實習(xí)創(chuàng)新模式具有校企合作緊，學(xué)生受益大的Y，K贏特點，在推進(jìn)學(xué)校內(nèi)涵建設(shè)，提高畢業(yè)生就業(yè)質(zhì)量等方面具有重要意義。</p> <p> 一、引言</p> <p> 當(dāng)今的高等教育已經(jīng)逐漸演變?yōu)橐环N大眾教育。尤其是招生數(shù)量逐年增加，在給高校帶來機遇和挑戰(zhàn)的同時，隨之而來的還有沉重的就業(yè)壓力。當(dāng)前的國際國內(nèi)的經(jīng)濟形勢更為大學(xué)畢業(yè)生就業(yè)工作雪上加霜，為積極應(yīng)對當(dāng)前的嚴(yán)峻態(tài)勢，各院校無不在思考，嘗試創(chuàng)新出一條行之有效的新出路。</p> <p> 企業(yè)要發(fā)展，有一種觀點是必須和大學(xué)院校建立一種共生的關(guān)系。同時，大學(xué)要適應(yīng)社會發(fā)展的需求，就必須走產(chǎn)學(xué)研相結(jié)合的發(fā)展道路，和企業(yè)結(jié)為平等的合作伙伴。畢業(yè)實習(xí)是學(xué)生就業(yè)前將理論知識運用于實踐，深人企業(yè)第一線的寶貴的實踐機會，是培養(yǎng)適合市場需求，滿足企業(yè)需要，解決學(xué)生動手能力不強的關(guān)鍵性環(huán)節(jié)，是提高畢業(yè)生綜合素質(zhì)和綜合職業(yè)能力的重要實踐教學(xué)手段。</p> <p> 二、傳統(tǒng)畢業(yè)實習(xí)模式及其存在的問題</p> <p> 目前，傳統(tǒng)的畢業(yè)實習(xí)一般采用集中實習(xí)或分散實習(xí)的方式進(jìn)行。</p> <p> 1.集中實習(xí)</p> <p> 集中實習(xí)一般是幾十個人一組，在專業(yè)老師的帶領(lǐng)下去同一實習(xí)基地實習(xí)，實習(xí)結(jié)束后，實習(xí)企業(yè)出具實習(xí)證明，實習(xí)學(xué)生離開實習(xí)企業(yè)。</p> <p> 這種傳統(tǒng)的由學(xué)校組織學(xué)生集體進(jìn)行畢業(yè)實習(xí)的做法，許多學(xué)生由于實習(xí)和求職經(jīng)常發(fā)生時間沖突，傾向于把畢業(yè)實習(xí)時間用來求職，進(jìn)而無暇進(jìn)行系統(tǒng)實習(xí)情況比較常見。許多高校把本科生畢業(yè)實習(xí)環(huán)節(jié)安排在大學(xué)四年級第二學(xué)期，而這期間又是畢業(yè)生求職、應(yīng)聘的時問。一些大學(xué)生把本該用來實習(xí)的時間，卻不得不忙著應(yīng)聘和復(fù)習(xí)，頻頻請假，根本顧不上安心到實習(xí)單位去實習(xí)。導(dǎo)致帶隊老師難以管理實習(xí)過程，企業(yè)的實習(xí)安排也無法兼顧到個別學(xué)生，導(dǎo)致這種實習(xí)方式企業(yè)和學(xué)生的關(guān)系松散，實習(xí)的效果很難如人意。</p> <p> 2.分散實習(xí)</p> <p> 分散實習(xí)一般是學(xué)生自己選擇實習(xí)單位進(jìn)行實習(xí)，采用這種模式進(jìn)行畢業(yè)實習(xí)，學(xué)生獨立工作的鍛煉機會較多。</p> <p> 受經(jīng)費緊張和學(xué)生求職的制約，很多學(xué)校部分采用了分散實習(xí)模式。由學(xué)生自己尋找實習(xí)單位、安排實習(xí)時間、自覺進(jìn)行實習(xí)。學(xué)校通過評審實習(xí)報告和評閱實習(xí)單位意見等方式，評價學(xué)生畢業(yè)實習(xí)的質(zhì)量，但是，由于缺乏對實習(xí)過程和內(nèi)容的管理，使得畢業(yè)實習(xí)質(zhì)量基本失去了控制。這種放任自流的實習(xí)方式，使得一些社會關(guān)系少且自身溝通能力較弱的學(xué)生，找不到實習(xí)單位;一些學(xué)生雖然找到了實習(xí)單位，但由于沒有全身心投人到實習(xí)中，得不到實踐鍛煉;還有一些學(xué)生雖然在一定時間里能夠投人實習(xí)，但由于缺乏教師指導(dǎo)，沒有加深對所學(xué)知識的理解。這也使教師失去了接觸實際工作、在指導(dǎo)學(xué)生實習(xí)中教學(xué)相長的良好機會，一些教師特別是年輕教師的教學(xué)和理論研究更加脫離實際。由于學(xué)校只能通過定期或不定期的電話聯(lián)系和巡視來考察，難以隨時掌握實習(xí)生的實習(xí)動態(tài)，無法客觀地評價實習(xí)生的職業(yè)能力和實習(xí)成績，使得實習(xí)效果也很難盡如人意。</p> <p> 以上兩種傳統(tǒng)的畢業(yè)實習(xí)模式，由于高校對畢業(yè)實習(xí)缺乏有效的質(zhì)量控制，流于形式的現(xiàn)象比較普遍，用人單位看重的學(xué)生畢業(yè)實習(xí)經(jīng)歷和實踐經(jīng)驗積累，看重的學(xué)生實際操作能力等均難以在畢業(yè)實習(xí)中得到提高，結(jié)果造成畢業(yè)實習(xí)與實踐經(jīng)驗的缺乏成為學(xué)生求職就業(yè)的蜘勸。</p> <p> 三、畢業(yè)實習(xí)創(chuàng)新模式及其特點</p> <p> 基于就業(yè)導(dǎo)向的畢業(yè)實習(xí)創(chuàng)新模式，就是將畢業(yè)實習(xí)與學(xué)生就業(yè)有機結(jié)合，學(xué)校利用結(jié)合自身優(yōu)勢，自主能動地為學(xué)生就業(yè)工作建立實習(xí)與就業(yè)基地，把學(xué)生的畢業(yè)實習(xí)安排在實習(xí)與就業(yè)基地進(jìn)行。</p> <p> 這種畢業(yè)實習(xí)創(chuàng)新模式既可以替代企業(yè)采用招聘的形式招聘新員工，也可以提高大學(xué)一年一度的為畢業(yè)生舉辦的求職招聘會的效度。企業(yè)可以充分觀察到在崗實習(xí)的學(xué)生真實表現(xiàn)和實際能力，通過雙向選擇，企業(yè)可以留用適合自己的學(xué)生。學(xué)生在充分了解實習(xí)企業(yè)的基礎(chǔ)上根據(jù)自己的意愿選擇留在企業(yè)，用人單位擇優(yōu)錄取實習(xí)學(xué)生。這種建立在用人意向上的畢業(yè)實習(xí)創(chuàng)新模式，能夠調(diào)動實習(xí)企業(yè)和實習(xí)學(xué)生的積極性，充分挖掘用人單位的培訓(xùn)資源，極大的促進(jìn)實習(xí)的順利完成，有利于為大學(xué)培養(yǎng)出綜合素質(zhì)更高的畢業(yè)生，同時實習(xí)學(xué)生也為用人單位的工作注人活力，促進(jìn)企業(yè)發(fā)展;同時使用人單位對畢業(yè)生的能力有了更深的了解，提前對擬招收的畢業(yè)生進(jìn)行了業(yè)務(wù)培訓(xùn)，保障了用人單位招聘員工的質(zhì)量;畢業(yè)生也能夠較早的了解實習(xí)單位的文化和環(huán)境，有利于將來盡快地融人到工作中去，對學(xué)校、畢業(yè)生和用人單位來說是一種”一舉多得”的多贏局面。畢業(yè)實習(xí)創(chuàng)新模式有如下特點:</p> <p> 1.就業(yè)導(dǎo)向，企業(yè)受益大</p> <p> 畢業(yè)實習(xí)創(chuàng)新模式，是校企雙方基于共同利益而建立起來的一種合作方式，是在企業(yè)確立用人意向的基礎(chǔ)上建立的實習(xí)模式，對于企業(yè)來說，這種實習(xí)模式不僅保證它能夠優(yōu)先選擇優(yōu)秀學(xué)生，而且能夠保證員工質(zhì)量。</p> <p> 首先，通過雙向選擇，吸引大批優(yōu)秀學(xué)生到單位參加生產(chǎn)實習(xí)，等于占有了大量的人才資源，通過幾個月的上崗實習(xí)的接觸和交流，單位對擬錄用畢業(yè)生的綜合素質(zhì)有了全面的了解，與傳統(tǒng)的筆試、面試等選拔人才的簡短流程相比，不僅擁有更多機會獲得優(yōu)秀的畢業(yè)生，更能保證所選擇畢業(yè)生的質(zhì)量。</p> <p> 其次，采用這種實習(xí)模式等于是提前進(jìn)行員工培訓(xùn)，目前，許多企業(yè)只是在需要人的時候才招聘畢業(yè)生，然后進(jìn)行簡單的培訓(xùn)就參與企業(yè)生產(chǎn)，由于對用人單位的工作環(huán)境和工作氛圍的不了解往往成為畢業(yè)生工作表現(xiàn)的絆腳石，甚至導(dǎo)致不能適應(yīng)環(huán)境而離開工作單位，給企業(yè)的工作造成困難。畢業(yè)實習(xí)創(chuàng)新模式使得用人單位可以有意識的培養(yǎng)適合自己企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的員工，通過實習(xí)的培養(yǎng)增加學(xué)生對單位工作生活環(huán)境和文化氛圍的了解，使學(xué)生在畢業(yè)后能夠盡快融人單位的工作環(huán)境。</p> <p> 2.雙向選擇，學(xué)生收獲多</p> <p> 用人單位通過雙向選擇得到選擇優(yōu)秀學(xué)生的優(yōu)先權(quán)，可以挑選最好的學(xué)生，同時可以及早地對將來要選擇的學(xué)生進(jìn)行培訓(xùn)和考核。實習(xí)學(xué)生通過雙向選擇有機會盡早地了解用人單位的工作氛圍和文化特色，有利于盡快融人用人單位。雙方通過雙向選擇才獲得的機會，都會比較珍惜這難得的機會，用人單位和實習(xí)學(xué)生通過雙向選擇能夠優(yōu)先選擇寶貴資源，從而達(dá)到雙贏。</p> <p> 第一，學(xué)生在校期間能夠進(jìn)人企業(yè)上崗實習(xí)，畢業(yè)后能夠與企業(yè)簽訂勞動用工協(xié)議，實現(xiàn)零距離就業(yè)，避免了因自主擇業(yè)失誤或盲目就業(yè)給自己帶來的經(jīng)濟損失和風(fēng)險。</p> <p> 第二，學(xué)生的實習(xí)既是將知識、理論轉(zhuǎn)化為實踐的過程，同時也是在與老員工共同工作中，應(yīng)用知識獨立解決問題的過程，在這一角色變換中，學(xué)生密切了與社會的聯(lián)系，加深了對所從事聊業(yè)崗位的理解，便于找準(zhǔn)自己的位置，容易樹立正確的就業(yè)觀和成才觀。</p> <p> 第三，學(xué)生在校期間就接受社會的鍛煉，提早接觸就業(yè)，為畢業(yè)時的就業(yè)積累經(jīng)驗，提高了自己的就業(yè)能力和社會適應(yīng)能力。實習(xí)生為了得到更好的工作必然要付出最大的努力，用人單位為了獲得更優(yōu)秀的員工，培訓(xùn)工作和考核就抓得更好，有利于調(diào)動雙方的積極性，促進(jìn)實習(xí)工作的圓滿完成。</p> <p> 第四，學(xué)生實習(xí)期間有經(jīng)濟收人，生活有保障。根據(jù)校企合作協(xié)議，學(xué)生上崗實習(xí)期間，享受實習(xí)工資和加班補貼，能使實習(xí)期間的生活有較好的保障。</p> <p> 3.結(jié)合緊密，實習(xí)效果佳</p> <p> 在畢業(yè)實習(xí)創(chuàng)新模式下，企業(yè)、學(xué)生、學(xué)校三者之間利益相關(guān)。因為實習(xí)生是企業(yè)未來的員工，所以企業(yè)對學(xué)生的培養(yǎng)會完全按照企業(yè)員工一樣嚴(yán)格要求，提供各種機會，讓學(xué)生頂崗實習(xí)、盡快掌握應(yīng)有的專業(yè)技能;充分讓學(xué)生參與到企業(yè)的生產(chǎn)、經(jīng)營、管理中去，完全感受企業(yè)的文化熏陶。而學(xué)生則希望通過實習(xí)留在企業(yè)工作，學(xué)習(xí)起來自然格外努力，且目的明確，效果自然不一樣。在這種既能完成教學(xué)任務(wù)又能促進(jìn)就業(yè)的實踐教學(xué)機制下，學(xué)校運作起來自然是不遺余力。</p> <p> 四、實例分析</p> <p> 為積極應(yīng)對當(dāng)前嚴(yán)峻的就業(yè)態(tài)勢，內(nèi)蒙古工業(yè)大學(xué)國際商學(xué)院嘗試創(chuàng)新出一條行之有效的新出路:即將畢業(yè)實習(xí)與學(xué)生就業(yè)有機結(jié)合起來，有力地推動了學(xué)生就業(yè)工作高效開展。</p> <p> 2007年下學(xué)期，我院和深圳某IT企業(yè)進(jìn)行了校企合作，達(dá)成了校企合作的意向，在該企業(yè)設(shè)立了學(xué)生實習(xí)與就業(yè)基地。同年底我院即根據(jù)協(xié)議約定向企業(yè)輸送了一批即將畢業(yè)的學(xué)生上崗實習(xí)，熟悉生產(chǎn)線的各個流程。兩個月后，經(jīng)過與企業(yè)的雙向選擇，大部分學(xué)生分別進(jìn)人了該公司的財務(wù)、商務(wù)、客服、物流等崗位，其余的學(xué)生因不適應(yīng)南方氣候或另外找到了工作而離開企業(yè)返校。在實習(xí)的兩個月期間，學(xué)生熟悉了工作流程，積累了經(jīng)驗，并取得了兩個月的實習(xí)工資，收獲頗豐。經(jīng)過近兩年的跟蹤調(diào)查，這批留下的學(xué)生表現(xiàn)出了良好的職業(yè)素質(zhì)，在去年的金融危機中，沿海一帶大批企業(yè)大量裁員的背景之下，這些學(xué)生無一人被裁掉，反而走上了更加重要的部門任職，被總部分別派往成都、重慶、南京、杭州、大連等地從事財務(wù)、商務(wù)等崗位。</p> <p> 根據(jù)近兩年對我院07屆電子商務(wù)專業(yè)學(xué)生的跟蹤調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，在深圳某企業(yè)實習(xí)期間表現(xiàn)突出的，有意愿留下的學(xué)生全部被接收，并且大多數(shù)直接被晉升為管理崗。由于他們在兩年內(nèi)工作狀態(tài)穩(wěn)定，表現(xiàn)突出，一部分已經(jīng)在給地區(qū)分公司擔(dān)任領(lǐng)導(dǎo)職務(wù)，全面負(fù)責(zé)業(yè)務(wù)的開展，而沒有參加深圳實習(xí)的同學(xué)大部分還沒有相對穩(wěn)定的職業(yè)，有了工作的同學(xué)在工作中也較少有所建樹。</p> <p> 兩相比較，我們感覺對于大學(xué)來說，這種創(chuàng)新實習(xí)模式可以充分利用企業(yè)現(xiàn)有的資源和條件，建立相對穩(wěn)定的實習(xí)和就業(yè)基地，迅速獲取行業(yè)的用人信息，貼近社會需求辦學(xué)，加強和企業(yè)的合作，尤其對于學(xué)生來說，能使他們迅速進(jìn)人狀態(tài)，減少摩擦失業(yè)的比例。</p> <p> 五、畢業(yè)實習(xí)創(chuàng)新模式的結(jié)果與效應(yīng)</p> <p> 好的實習(xí)模式能夠成為企業(yè)和學(xué)校良性互動的橋梁，幫助學(xué)校和企業(yè)建立長期的合作的關(guān)系。事實表明，基于就業(yè)導(dǎo)向的畢業(yè)實習(xí)創(chuàng)新是切實可行的，是卓有成效的，將實習(xí)與就業(yè)相結(jié)合的探索是有益的，效果顯著的。這種畢業(yè)實習(xí)創(chuàng)新模式的試行表現(xiàn)出如下積極的效應(yīng):</p> <p> 1.是實現(xiàn)產(chǎn)學(xué)結(jié)合的有效方法之一</p> <p> 第一，在這個模式下，企業(yè)通過實習(xí)不斷考察學(xué)生，塑造學(xué)生，培養(yǎng)符合自己企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的員工。學(xué)生以企業(yè)員工的身份直接參與企業(yè)的生產(chǎn)實踐，人才培養(yǎng)的目的性和針對性強。</p> <p> 第二，在這個模式下，學(xué)校根據(jù)企業(yè)的崗位需求，有針對性地加強專業(yè)和技能培養(yǎng)，最終實現(xiàn)畢業(yè)生的充分有效就業(yè)。</p> <p> 第三，在這個模式下，學(xué)生實現(xiàn)了實習(xí)就業(yè)一體化，企業(yè)完成了新員工向老員工的培訓(xùn)，使得學(xué)生一畢業(yè)就能上崗，避免了教育與生產(chǎn)中間環(huán)節(jié)的資源浪費。</p> <p> 第四，畢業(yè)生選擇職業(yè)不能脫離社會需要，通過畢業(yè)實習(xí)創(chuàng)新模式，學(xué)生學(xué)會了把社會需求作為出發(fā)點和歸宿，結(jié)合自己的專業(yè)和興趣來定未來取刊七發(fā)展方向，做出符合自己愿望與社會需求的理性就業(yè)選擇，實現(xiàn)與社會需求的融合，這對畢業(yè)生知識的資本化以及綜合能力的可持續(xù)開發(fā)具有深遠(yuǎn)的意義，同時對社會經(jīng)濟增長又具有促進(jìn)作用。</p> <p> 2.推進(jìn)學(xué)校的內(nèi)涵建設(shè)</p> <p> 適用畢業(yè)實習(xí)創(chuàng)新模式的企業(yè)一般是用人量大、接納能力強、產(chǎn)品品種多，技術(shù)優(yōu)勢明顯的大中型企業(yè)，它希望學(xué)校能成為它的后備人才庫。一旦潛在需求被激發(fā)，他們愿意為學(xué)校的發(fā)展和專業(yè)的建設(shè)出謀劃策，乃至出錢出力出技術(shù)。這對于目前我國高等教育而言，無疑是雪中送炭。目前，大學(xué)和企業(yè)平等合作關(guān)系的建立并不是很樂觀，這樣的機制有利于雙方合作關(guān)系的建立。雙方良好的合作，不僅有利于解決大學(xué)的學(xué)生實習(xí)、就業(yè)等實際問題，也有助于推動專業(yè)的建設(shè)與發(fā)展。</p> <p> 3.提高畢業(yè)生就業(yè)質(zhì)量</p> <p> 畢業(yè)實習(xí)創(chuàng)新模式為學(xué)生、企業(yè)提供了一個相互考察，相互了解和選擇的平臺，對提高畢業(yè)生就業(yè)質(zhì)量非常有益。第一，學(xué)生到企業(yè)參加實習(xí)后，耳濡目染了企業(yè)的文化，熟悉了行業(yè)知識，了解了業(yè)界的行情，當(dāng)他們面臨職業(yè)的選擇時，就不再會盲目和盲從。第二，畢業(yè)實習(xí)創(chuàng)新模式有利于學(xué)生快速完成專業(yè)知識向職業(yè)能力的轉(zhuǎn)化，縮短擇業(yè)周期。第三，畢業(yè)實習(xí)創(chuàng)新模式讓學(xué)生提前接觸與自己職業(yè)發(fā)展相關(guān)的實際工作。獲得職業(yè)崗位的感性認(rèn)識及職業(yè)素質(zhì)，培養(yǎng)出未來職業(yè)的適應(yīng)能力，學(xué)會根據(jù)社會需求不斷充實和完善自己，順利完成角色定位。這都有利于提高就業(yè)穩(wěn)定率。</p> <h2>第2篇：爺爺?shù)拇竽⒐椒段?/h2> <p> [關(guān)鍵詞] 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 視網(wǎng)膜細(xì)胞 大鼠</p> <p> 成體干細(xì)胞中的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cells, MSCs）具有多向分化的潛能，雖然其來源于中胚層，卻可以跨胚層分化為外胚層來源的組織細(xì)胞，而視網(wǎng)膜則來源于胚胎期神經(jīng)外胚層。MSC表達(dá)許多生長因子和細(xì)胞因子受體以及細(xì)胞與細(xì)胞黏附作用的受體，提示MSC的功能受自分泌和旁分泌循環(huán)的調(diào)控。這成為不同方法誘導(dǎo)MSCs定向分化的理論基礎(chǔ)。組織或細(xì)胞在受到損傷后會進(jìn)行自身修復(fù)，視網(wǎng)膜是接受光能，形成視覺的重要組織結(jié)構(gòu)，如果光照強度或光照時間超過了視網(wǎng)膜的承受力，將會造成視網(wǎng)膜光損傷。本研究旨在用光損傷視網(wǎng)膜片的培養(yǎng)上清液體外誘導(dǎo)MSCs，看其損傷時分泌的細(xì)胞因子和分化所需蛋白是否能誘導(dǎo)MSCs分化為視網(wǎng)膜光感受器樣細(xì)胞和視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞。探索體外構(gòu)建MSCs分化成視網(wǎng)膜細(xì)胞所需微環(huán)境的理論可能性。</p> <p> 1材料與方法</p> <p> 1.1 實驗動物</p> <p> 健康無眼病成年Sprague-Dawley(SD)大鼠，雌雄不限，體重120~150g（吳氏實驗動物中心）。</p> <p> 1.2 大鼠視網(wǎng)膜片的取材</p> <p> 10%水合氯醛按0.3mL/100g腹腔注射麻醉，無菌狀態(tài)下取出眼球。把眼球用10%FBS的LG-DMEM洗滌3次，去除球周筋膜組織，清洗干凈后移入另一盛有10% FBS的LG-DMEM培養(yǎng)皿中，在解剖顯微鏡下，在角鞏膜緣后1mm處剪開，用顯微剪取出角膜、晶狀體、玻璃體，留有外層覆蓋鞏膜的視網(wǎng)膜杯。把視網(wǎng)膜杯浸入培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)液里，由杯緣向杯底，用顯微鑷鈍性分離視網(wǎng)膜和鞏膜，在視神經(jīng)處剪斷，徹底分離視網(wǎng)膜色素上皮層與視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層。</p> <p> 1.3 大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層常規(guī)石蠟切片HE染色</p> <p> 將大鼠視網(wǎng)膜片（只包含神經(jīng)上皮層）常溫浸泡甲醛24h以固定，常規(guī)脫水、透明、包埋、切片，常規(guī)脫蠟，行蘇木素-伊紅(HE)染色，封片。用數(shù)字?jǐn)z像系統(tǒng)觀察并采集照片。</p> <p> 1.4 視網(wǎng)膜片光損傷和條件培養(yǎng)液的制備</p> <p> 把分離好的4只眼球的視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層移入另一盛有8mlNeurobasal+B27的小培養(yǎng)皿中（直徑60mm）。用眼科顯微剪把視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層剪成1mm×1mm×1mm大小。在超凈臺內(nèi)，50W,12V的鹵素?zé)糇鳛楣庠矗扇≈甭涫秸丈渖鲜龅男∨囵B(yǎng)皿，用TES-1330A照度計測定光照強度，調(diào)整光源與培養(yǎng)皿之間的距離（3.5cm），使被照細(xì)胞同一水平的光照強度為(1950 ±200) Lux ,光照時該水平溫度變化在0.5℃之內(nèi)，持續(xù)光照45min，光照后將培養(yǎng)皿放入37℃、5%CO2飽和濕度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)1小時15min。用去針頭的針筒吸出小培養(yǎng)皿中的液體，離心后上清液用0.22um濾器過濾，以2:3的比例與10%FBS-LGDMEM混合，并吹打均勻，制成條件培養(yǎng)液Ⅰ。條件培養(yǎng)液Ⅱ制備方法同條件培養(yǎng)液Ⅰ，只是視網(wǎng)膜片未經(jīng)過光損傷處理，盛有Neurobasal+B27和視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層的小培養(yǎng)皿直接放入37℃、5%CO2飽和濕度培養(yǎng)箱培養(yǎng)2小時。條件培養(yǎng)液Ⅲ為Neurobasal+B27和10%FBS-LGDMEM以2：3的比例混合，無視網(wǎng)膜片以及光損傷處理。三種條件培養(yǎng)液均放于-20℃保存。</p> <p> 1.5 視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層光損傷后電鏡觀察</p> <p> 取材，3%戊二醛―1.5%多聚甲醛前固定，1%鋨酸―1.5%亞鐵氰化鉀后固定，酒精―丙酮脫水，環(huán)氧樹脂618包埋劑包埋；超薄切片，醋酸鈾、檸檬酸鉛染色，日立Hu-12A型（飛利浦208型）透射電鏡觀察、攝影。</p> <p> 1.6 大鼠MSC的分離和培養(yǎng)</p> <p> 取SD大鼠，麻醉后，無菌條件下取出雙側(cè)股骨和脛骨，剔除周圍肌肉組織。在超凈臺內(nèi)，用PBS沖干凈，轉(zhuǎn)移到盛有20%FBS-LGDMEM的培養(yǎng)皿中，去除長骨2端骨骺，暴露骨髓腔。用培養(yǎng)液沖出骨髓腔內(nèi)的骨髓液，吹打。用200目篩網(wǎng)過濾后置于離心管中，1000rpm,10min，棄上清，用10%FBS-LGDMEM培養(yǎng)液重懸后以10×108/mL接種于塑料培養(yǎng)瓶中。37℃、5%二氧化碳培養(yǎng)，24h換液，以后每3d換液一次，除去非貼壁細(xì)胞，12~15d后MSC達(dá)90%瓶底面積時傳代，P1后細(xì)胞融合至80%進(jìn)行1：2傳代。</p> <p> 1.7 MSC的鑒定</p> <p> 當(dāng)?shù)?代的BMSCs融合達(dá)90%,經(jīng)0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA消化、離心后用PBS制成2×106/mL的細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分裝至4只樣品管中，分別加入熒光標(biāo)記的小鼠抗大鼠單抗CD34-FITC+小鼠抗大鼠單抗CD90-PE，小鼠抗大鼠單抗CD34-FITC+小鼠抗大鼠單抗CD44-PE及其對應(yīng)的同型對照各10μL，混勻，37℃下避光反應(yīng)20min。每管加入1mLPBS混勻，離心2000rpm，10min以洗去未標(biāo)記上的抗體。棄上清液，每管再加入1mLPBS重新混懸細(xì)胞,用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表面抗原CD34、CD44和CD90的表達(dá)。對細(xì)胞純度進(jìn)行鑒定。</p> <p> 1.8 MSC體外誘導(dǎo)成視網(wǎng)膜細(xì)胞</p> <p> 取第3代BMSCs細(xì)胞消化、離心后用10%FBS-LGDMEM重懸后以200ul/孔接種于6孔板，24h待BMSC貼壁后，棄培養(yǎng)液，將細(xì)胞分為3組：第1組換用條件培養(yǎng)液Ⅰ，第2組換用條件培養(yǎng)液Ⅱ，第三組換用條件培養(yǎng)液Ⅲ，3個組均在在37℃、5%CO2培養(yǎng)箱孵育。每天觀察記錄細(xì)胞生長分化情況，每2天換一次條件培養(yǎng)液，培養(yǎng)至第7~8天時停止。</p> <p> 1.9 誘導(dǎo)的BMSCs細(xì)胞免疫化學(xué)染色</p> <p> 采用Envision二步法，分別將3組誘導(dǎo)的MSC玻片取出，均與神經(jīng)元特異性標(biāo)志小鼠抗大鼠醇化酶(NSE) （稀釋度1：50）（美國Fisher Scientific公司）、星形膠質(zhì)細(xì)胞特異性標(biāo)志小鼠抗大鼠單克隆抗體神經(jīng)膠質(zhì)酸性蛋白(GFAP) （稀釋度1：50）（美國Fisher Scientific公司）、光感受器特異性標(biāo)志小鼠抗大鼠單克隆抗體視紫質(zhì)(Rhodopsin) （稀釋度1：50）（美國Fisher Scientific公司）和二抗（生物素標(biāo)記的羊抗鼠IgG抗體）作用，二氨基聯(lián)苯胺（diaminobenzidin,DAB）顯色后，蘇木素復(fù)染，室溫干燥后封片，光鏡下觀察是否表達(dá)視紫紅質(zhì)、NSE、GFAP。選取至少10個隨機視野，每個視野在200倍物鏡下統(tǒng)計陽性細(xì)胞數(shù)和整個視野細(xì)胞總數(shù)，計算陽性細(xì)胞率，測量值均以x±s表示，來對三種誘導(dǎo)條件下所表達(dá)的陽性細(xì)胞進(jìn)行分析。</p> <p> 1.10 數(shù)據(jù)分析方法</p> <p> 所有數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，并進(jìn)行雙因素方差分析。</p> <p> 2 結(jié)果</p> <p> 2.1 大鼠視網(wǎng)膜片光損傷電鏡觀察所見:光損傷后視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層，可見光感受器外段腫脹成圓形，盤膜結(jié)構(gòu)紊亂，疊狀結(jié)構(gòu)解離，膜間隙增大。內(nèi)節(jié)線粒體固縮和腫脹，空泡變性。染色質(zhì)濃染，核膜皺縮內(nèi)陷。</p> <p> 2.2 大鼠MSC細(xì)胞的鑒定(如圖1)</p> <p> 圖1 大鼠MSC細(xì)胞的鑒定</p> <p> BMSCs流式細(xì)胞術(shù)鑒定結(jié)果，培養(yǎng)的第三代BMSCs干細(xì)胞表面標(biāo)志CD90陽性（CD90+/CD34-：92%），基質(zhì)細(xì)胞表面標(biāo)志CD44陽性（CD44+/CD34-：93%）</p> <p> 2.3 誘導(dǎo)分化的細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察（如圖2）</p> <p> A：3天后原來梭形的BMSCs胞體發(fā)生收縮，呈圓形或橢圓形，細(xì)胞邊緣變得不規(guī)整，有零星的細(xì)胞突起×300；B：4天后BMSCs有較多突起×300；</p> <p> C、D：7天后，細(xì)胞發(fā)生遷移并相互之間建立突觸聯(lián)系×200；E：對照組BMSs分化細(xì)胞明顯減少，也少有建立突觸聯(lián)系的細(xì)胞×300。</p> <p> 圖2 誘導(dǎo)分化的BMSCs形態(tài)學(xué)觀察</p> <p> 2.4 誘導(dǎo)分化的視網(wǎng)膜樣細(xì)胞不同誘導(dǎo)條件下免疫細(xì)胞化</p> <p> 學(xué)染色表達(dá)指標(biāo)陽性率</p> <p> 表1 不同誘導(dǎo)條件下免疫細(xì)胞化學(xué)染色表達(dá)指標(biāo)陽性率</p> <p> 注：均方比F值為7.6054，F(xiàn)0.05=6.944，可見視網(wǎng)膜片三組間兩兩比較差異有顯著性（P ＜0.05）。</p> <p> 3 討論</p> <p> 3.1視網(wǎng)膜光損傷</p> <p> 視網(wǎng)膜是接受光能，形成視覺的重要組織結(jié)構(gòu)，但也是眼組織中最易受到光損傷的部位。如果光照強度或光照時間超過了視網(wǎng)膜的承受能力，將會造成視網(wǎng)膜光損傷。</p> <p> 本實驗采用（50W,12V的鹵素?zé)糇鳛楣庠矗扇≈甭涫秸丈渖鲜龅男∨囵B(yǎng)皿，1950 ±200Lux）主要是考慮到以下幾點：①視網(wǎng)膜光損傷受諸多因素影響，內(nèi)在因素包括視網(wǎng)膜部位、體溫、膚色、年齡、種屬、營養(yǎng)狀態(tài)及晶體狀況，外在因素包括視網(wǎng)膜暗適應(yīng)狀態(tài)、光照射方式、光強度、波長和光照時間。因此本實驗選擇單純照射細(xì)胞而不是照射活體動物來盡量排除內(nèi)在因素的干擾，選擇成年SD白鼠是考慮到有研究表明白種人較黑種人容易損傷，大白鼠視網(wǎng)膜對光的敏感性隨著年齡的增加而增高。②視網(wǎng)膜光化學(xué)損傷的敏感性隨著光波長的縮短而呈對數(shù)上升，因此短波長更易引起視網(wǎng)膜光損傷，角膜可吸收</p> <p> 3.2 MSC細(xì)胞分離、培養(yǎng)、鑒定</p> <p> 用組織工程技術(shù)體外分離和培養(yǎng)所需靶細(xì)胞，用于體內(nèi)相關(guān)疾病的細(xì)胞替代治療為多種疾病帶來了新的治療思路。因此有關(guān)此類的研究受到廣泛關(guān)注。胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育全能性，但涉及倫理學(xué)問題，以往受到很大限制，發(fā)展緩慢。應(yīng)用眼色素上皮緣的視網(wǎng)膜干細(xì)胞[3]及鼠腦神經(jīng)先祖細(xì)胞移植[4]也由于供體組織有限性及安全性問題，不利于治療視網(wǎng)膜疾病的開展。于是有人把目光投向成體干細(xì)胞中的MSCs，因其來源于中胚層，可以跨系統(tǒng)甚至跨胚層分化為3個胚層來源的細(xì)胞，特別是中胚層和神經(jīng)外胚層來源組織的細(xì)胞（視網(wǎng)膜來源于胚胎期神經(jīng)外胚層），并且經(jīng)過20~30次細(xì)胞分裂后，這種分化特性也不會消失[5]。且分離培養(yǎng)方便。MSC存在于體內(nèi)多處如胎血、胎肝、胎脾、胎兒的骨髓以及成人骨髓[6], 臍血、脂肪組織和成人的外周血中亦含有數(shù)量極少的間質(zhì)干細(xì)胞[7]，現(xiàn)多從骨髓中分離獲得。MSC的純化方法有貼壁篩選法，流式細(xì)胞儀分選法，密度梯度離心法，免疫磁珠法。較常采用的方法為貼壁篩選法和密度梯度離心法，或兩者聯(lián)合。MSCs的表面標(biāo)志具有非單一性，表達(dá)了間質(zhì)細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和表皮細(xì)胞的表面標(biāo)志，一般認(rèn)為CD29、CD44、CD71、CD90、CD105、CD120a、CD124、CD166以及STRO-1、SH2、SH3是其重要的標(biāo)志物，流式細(xì)胞術(shù)發(fā)現(xiàn)不表達(dá)造血細(xì)胞表面抗原如CD34、CD45、CD11a、CD14。如果能找到更特異性標(biāo)記物，就可以獲得更純的MSCs，這對后續(xù)的實驗步驟所得的實驗數(shù)據(jù)有重要影響。前2種方法分離所獲得的細(xì)胞純度較低,但具有良好的細(xì)胞分化能力。應(yīng)用流式細(xì)胞儀技術(shù)和磁性分選技術(shù)針對細(xì)胞表面標(biāo)志進(jìn)行富集和分離,分選效率和純度均較高[8-9]。</p> <p> 3.3 MSC體外誘導(dǎo)成視網(wǎng)膜細(xì)胞</p> <p> 目前國內(nèi)外主要用生長因子誘導(dǎo)MSCs分化為視網(wǎng)膜細(xì)胞。Anthony K等[8]發(fā)現(xiàn)EGF、taurine或activinA體外誘導(dǎo)大鼠MSCs，有20%~32%表達(dá)視網(wǎng)膜光感受器細(xì)胞的表面抗原視紫紅質(zhì)。Anthony K等[8]應(yīng)用activinA（活化蛋白A），牛磺酸和EGF對成人CD90+MSCs體外誘導(dǎo)分化后，20%-32%的細(xì)胞表達(dá)感光細(xì)胞特異標(biāo)志―視紫紅質(zhì)，視蛋白，recoverin。非視網(wǎng)膜來源的，可替代視網(wǎng)膜細(xì)胞功能的自體細(xì)胞是細(xì)胞移植治療視網(wǎng)膜變性疾病和視神經(jīng)損傷的理想種子細(xì)胞，目前國外有少量研究發(fā)現(xiàn)MSCs視網(wǎng)膜下移植可誘導(dǎo)分化為視網(wǎng)膜細(xì)胞，但由于體內(nèi)局部微環(huán)境復(fù)雜，影響因素繁多，移植細(xì)胞的分化方向不確定，往往無法定向分化成所需細(xì)胞，存在表達(dá)增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變的潛在危險。而體外誘導(dǎo)MSCs定向分化為視網(wǎng)膜細(xì)胞仍是當(dāng)前研究的難點。國內(nèi)外僅數(shù)篇文獻(xiàn)報道用視網(wǎng)膜片培養(yǎng)上清液體外誘導(dǎo)MSCs分化為視網(wǎng)膜樣細(xì)胞，但均未對培養(yǎng)上清液成分進(jìn)行具體分析檢測，分析其有效成分。本實驗探索體外誘導(dǎo)MSCs定向分化的新途徑，可進(jìn)一步進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)檢測不同誘導(dǎo)微環(huán)境的蛋白差異，為構(gòu)建MSC體外誘導(dǎo)分化為視網(wǎng)膜細(xì)胞的微環(huán)境提供理論支持。這不僅解決了直接將MSCs體內(nèi)移植分化方向不確定的問題，以及應(yīng)用異體的人視網(wǎng)膜片誘導(dǎo)時可能引發(fā)排斥反應(yīng)等問題。</p> <p> 參考文獻(xiàn)：</p> <p> [1]Noell WK.Possible mechanisms of photo receptor damage by light in mammalian eyes[J]. Vision Res,1989,20(12):1163-1171.</p> <p> [2] 宋憶淑，賀 冰，費向東，等. 可見光照射致培養(yǎng)的視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞凋亡的超微結(jié)構(gòu)觀察[J].中國老年學(xué)雜志,2001,25(1):69-70.</p> <p> [3] Tropepe K, Brenda LK,Bernard JC, et al. Retinal stem cells in themammalian eye[J].Science, 2000,287:2032-2036.</p> <p> [4] Van Hoffelen, Samantha J. Young, Michael J.Shatos, et al. Incorporation of murine brain progenitor cells into the developing mammalian retina[J].Invest.Ophthalmol.Vis.sci,2003,44:426.</p> <p> [5] Friedenstein AJ,ChailakhyanRK,GerasimonUV.Bone marrow osteogenic stem cells:in vitro cultivation and transplantation in diffu-sion chamber[J].Cell Tissue Kinet,1987,20(3):263-272.</p> <p> [6] Campagnoli C,Roboerts AG,Kumar S,et al.Identification of mesenchymal stem progenitor cells in human first-trimester fetal blood,liver,and bone marrow[J].Blood,2001,98(8):1396-1402.</p> <p> [7] EricesA,Conget P,Minguell JJ.Mesenchymal progenitor cells in human umbilical cord blood[J].Br J Haematol,2000,109(1):235-242.</p> <h2>第3篇：爺爺?shù)拇竽⒐椒段?/h2> <p> 小豬嘟嘟今天打扮的十分的帥氣，原來嘟嘟是要去參加小兔貝貝的生日party。嘟嘟可沒去過貝貝家呀！</p> <p> 嘟嘟走到一個十字路口迷了路，正著急呢！忽然看見一只烏龜正慢悠悠的走了過來，嘟嘟連忙上前非常有禮貌的說：“烏龜?shù)艿埽阒廊ツ⒐酱逶趺醋邌幔俊薄澳憬形沂裁矗叶?80歲了，太沒禮貌了。”還沒等嘟嘟把話說完呢，這位烏龜爺爺便生氣的走開了</p> <p> 嘟嘟納悶的看著還沒走遠(yuǎn)的烏龜爺爺“有事需要幫忙嗎？” 哦，是一條長著胡須，但看上去很紳士的牧羊犬，嘟嘟還是很有禮貌的說：“狗爺爺，您知道去蘑菇村怎么走嗎？”“不，我看上去有那么老嗎？我今年可只有10歲啊！真是豈有此理。”他看上去比烏龜爺爺更加生氣。</p> <p> 嘟嘟無可奈何的繼續(xù)往前走，迎面走來一頭大象，嘟嘟想：這龐然大物的家伙年紀(jì)一定不小了，肯定得叫爺爺。嘟嘟仍然非常有禮貌的問：“象爺爺，你知道去蘑菇村怎么走嗎？”小象先是一楞，馬上又哈哈大笑起來：“你叫我爺爺，可我才兩歲呢！”嘟嘟的臉?biāo)⒌募t了，摸著頭非常難為情的說：“對不起，小象弟弟你知道去蘑菇村怎么走嗎？”“我?guī)闳グ桑　毙∠笥淇斓恼f。………</p> <h2>第4篇：爺爺?shù)拇竽⒐椒段?/h2> <p>在哈木果爾森林中住著各種動物，動物們相處融洽，不管是獅子與兔子還是鳥類與蝗蟲他們之間都從未爆發(fā)戰(zhàn)爭，動物們常說這是一棵古樹所賜，這棵古樹取日月之精華，天地之靈氣具與其身。</p> <p> 有善良的小狗一家，一家人勤勤懇懇，他們有兩個孩子，老大叫京京，老二叫童童。災(zāi)難偏偏降臨到他們家，無情的病魔奪去了京京父母的生命。</p> <p> 一年后，京京五歲，弟弟童童三歲。昨天家里儲藏的蘑菇吃光了，為了不讓弟弟和自己挨餓，京京一大早挎著籃子出來了。京京走在大自然的懷抱里，太陽公公把自己幾綹金色的胡須向大地拋去，可京京已無心觀賞春景，只想快點找到蘑菇，好填飽肚子。京京走呀走，胳膊被壓紅了，就換另一只，頭上的汗已順著面頰流了下來。京京實在頂不住了便歇了下來。他看到了那棵古樹便好奇的走了過去，摸摸這兒，碰碰那兒，突然古樹開口說話了：“京京，乖孩子，告訴樹爺爺遇到什么難事了？”京京并沒有感到很驚訝，把事情原原本本地告訴了古樹。聽過京京的話，樹爺爺笑了笑，煞時，天空下起了小雨，聰明的京京用籃子遮住自己的身子沒有被雨淋到。</p> <p> 雨停了，天邊出現(xiàn)了一道長長的彩虹，小狗京京的身邊神奇的長出了許多蘑菇，大的、小的、漫山遍野的都是。京京臉上露出了久違的笑容，樹爺爺又說話了：“京京，蘑菇是生長在陰暗潮濕的地方，以后有什么不懂的問題盡管來找我，哈哈……”古樹又變成原來的樣子。京京盡情的采著蘑菇，享受著陽光。幽幽群山笑了，顯得更綠了；清凌凌的小河笑了，泛起層層晶瑩的浪花；小樹們笑了，擺動著柔軟的嫩枝；小狗京京也笑了，笑的那么燦爛，那么幸福……</p> <p></p> <h2>第5篇：爺爺?shù)拇竽⒐椒段?/h2> <p>從前，有一只小兔叫小蘭。因為她是從城里來的，所以經(jīng)常對森林的伙伴們看不起。</p> <p> 有一天，天下起了大雨，小蘭躲在她的小蘑菇屋子里，吃著胡蘿卜，舒服極了。這時，跑來了一只小雞。小雞用它那濕透了的翅膀敲著門，說：“里面有人嗎，里面有人嗎？我是小雞，我迷路了！外面下著大雨，好冷啊！里面的人行行好，開開門吧！”小蘭聽了，打開了門，看見渾身濕透的小雞，卻立即把門關(guān)上了。還送了小雞一句話：“小雞啊小雞，不是我說你，都渾身是水了還敢來我家？也不怕糟蹋了我家的地板？”聽了這話，小雞失望地走了。</p> <p> 有一次，一只小灰兔來找小蘭。她說：“小蘭姐姐，我想用2個胡蘿卜換你的一個蘑菇好不好？”“哼，你那胡蘿卜肯定是不干不凈的東西！我小蘭可不是好糊弄的！”說著把門一關(guān)。小灰兔傷心的走了……</p> <p> 種種類似的事情在發(fā)生，小伙伴們都討厭起了小蘭。小蘭有些奇怪：怎么最近大家都不理我了？她找到了最有學(xué)問的龜爺爺。龜爺爺捋了捋胡子笑瞇瞇地對她說：“小蘭，你應(yīng)該改一改你的性格。你的性格有些驕傲，所以會瞧不起人。你回去再想想你的那些行為吧！”</p> <p> 不久，小蘭果然變得平易近人了。她有了很多朋友。她再次去開心地線龜爺爺匯報時，龜爺爺笑著說：“這就是玉不鑿，不成器啊！”</p> <p></p> <h2>第6篇：爺爺?shù)拇竽⒐椒段?/h2> <p> 那時候,爺爺在部隊當(dāng)參謀,年輕干練的他得到了女兵們的青睞。但是爺爺卻滿腦袋頑固的思想,一心要找個同鄉(xiāng)當(dāng)媳婦。</p> <p> 家鄉(xiāng)人給爺爺物色了一個女子,她身材不高,但是長相好看,還是個文化人。</p> <p> 第一次見面,爺爺帶她去城里最好的飯館吃飯,并點了一條價格不菲的魚。他們沒怎么說話,爺爺一直喝著小酒。一頓飯吃完,她成了我的奶奶。</p> <p> 若干年后,我好奇地追問起爺爺奶奶的愛情,爺爺指著桌上的魚一本正經(jīng)地說:“第一次見面我就發(fā)現(xiàn),這個女人特別能吃,一個人就把魚吃光了。”奶奶嚷道:“誰讓你點那么貴的魚?不吃都浪費了!”爺爺看著我,狡黠地笑了。</p> <p> 也許就是從那個時候起,爺爺愛上了吃魚,特別是奶奶做的魚。紅燒魚、糖醋魚、清燉魚、炸小魚……每一條魚都是美味,連魚刺都透著誘人的香。</p> <p> 五十多年就這樣悄然滑過。爺爺轉(zhuǎn)業(yè)、退休,奶奶也成了老婆婆。可還是有些東西沒有變,那就是流溢在餐桌上的魚香。</p> <p> 然而,在流逝的歲月里,我們無法抵擋病痛和衰老。2005年,奶奶病重,醫(yī)院也準(zhǔn)備放棄治療,但是在最后的關(guān)頭,奶奶挺了過來。大病初愈的奶奶十分虛弱,給爺爺做魚的任務(wù)就落在了舅舅們身上。幾個舅舅輪番上陣,十八般武藝全使了出來,可爺爺只嘗了一口就放下了筷子,說:“不是你媽做的味。”媽媽只好請奶奶在旁邊指揮,每一步都按照奶奶的指令來進(jìn)行。一盤紅燒魚上桌了,爺爺笑著夾了一塊魚皮。然后,他搖了搖頭。我們都想不通,用一樣的調(diào)料,一樣的工序,味道怎么會不同?可是爺爺再也沒有碰過這盤魚。</p> <p> 奶奶的身體慢慢好了起來,康復(fù)后的第一次下廚,奶奶就做了一條魚。那天,魚上桌的時候,爺爺?shù)难劬σ幌伦恿亮?說:“這條魚是老婆子做的!”</p> <p> 爺爺一天天老了,記憶力也在不斷減退。他開始忘記孫子們的年齡,忘記自己的往事,甚至忘記自己5分鐘前剛吃過飯。但是,有一點他卻怎么也忘不掉,那就是老婆子做的魚好吃。</p> <p> 早晨,爺爺出門散步,回來的時候,提著幾條鮮魚。“老婆子,中午做魚!”不一會兒,爺爺又出門了,回來的時候又提著一條魚。“早晨剛買了幾條魚!”奶奶在廚房里嚷嚷。“早晨你買魚了?”爺爺愣住了。“不是你買的嗎?”奶奶火更大了。“我早晨就沒出去!”爺爺?shù)幕鹨采蟻砹恕Ｄ棠汤_冰箱讓爺爺看。爺爺樂了:“這是你買的魚呀?我最喜歡吃魚了。”奶奶“砰”的一聲關(guān)上冰箱,氣呼呼地到廚房去了。</p> <p> 正午,奶奶在廚房里煎炒烹炸。爺爺端著酒杯,從門縫里探進(jìn)頭來:“老婆子,中午有魚呀?”奶奶大吼一聲:“出去!”爺爺順從地帶上門,美滋滋地說:“有魚吃!老婆子做的魚好吃。”奶奶終于忍不住笑了。</p> <p> 我一直在想,為什么爺爺忘不了奶奶做的魚,甚至能從一樣的制作方法里嘗出不一樣的魚味?后來,我明白了。那魚的味道,大概就是他們五十多年來愛的味道吧。</p> <p> 紅燒魚的做法:</p> <p> 原料:鯉魚一條。熟雞肉半兩,切薄片。鮮蘑菇半兩,切片。筍子半兩,切成薄片后在沸水中煮五分鐘。蔥半兩,切段。老姜一小塊,切片。蒜兩瓣,切片。醬油兩大匙。淀粉一大匙,用水兌成芡汁。料酒一大匙。香油一匙。鹽、味精適量。</p> <p> 做法:</p> <p> 1.將整理好的魚抽筋后,在魚身兩面等距離各劃五六刀,抹上鹽和料酒,靜置半小時入味。</p> <p> 2.鍋中放油燒至七成熱,下魚炸呈微黃色撈出待用。</p> <p> 3.鍋中留約一兩余油,燒至四成熱,改小火下姜片、蒜片、蔥段炒出香味。</p> <p> 4.再倒入雞肉片、筍片、蘑菇片,改中火炒半分鐘。</p> <p> 5.加一斤湯或水,下魚、醬油、鹽燒約三分鐘,翻面再燒三分鐘。撈起裝盤待用。</p> <p> 6.將鍋中的湯汁勾芡后,淋入魚盤中即成。</p> <p> 豆腐皮炒青菜</p> <p> 原料:豆腐皮半張,青菜適量。</p> <p> 做法:</p> <p> 1.把豆腐皮切成菱形塊。</p> <p> 2.將青菜洗凈,切成段。</p> <h2>第7篇：爺爺?shù)拇竽⒐椒段?/h2> <p> 夜楓玲的扮演人出來~(???)/~啦是：冰封之蝶！撒花~撒花~</p> <p> 司徒茵的扮演人出來~(???)/~啦是：星星許諾！撒花~撒花~</p> <p> 沒有當(dāng)上的荷葉們o(>?<)o不要灰心，以后還有機會滴！……</p> <p> 我估計，到第四章才會有新的人物(o)哦！可以先報名！（女生）</p> <p> 第二章　楓玲和櫻玲的夢</p> <p> 上課了，老師還沒?(?_?)?有來。楓玲和櫻玲就一直在(ˇ&#717;ˇ） 想～茵茵說的話……</p> <p> 突然，她們看見坐在她們前一排的茵茵像凳子上長了刺一樣，不停地在扭動著身體。楓玲和櫻玲剛(ˇ&#717;ˇ） 想～叫住茵茵，突然，她們發(fā)現(xiàn)，情況不對，茵茵她扭著扭著——竟然扭出了一條貓尾巴！！！她們驚呆了！！！這是，櫻玲又發(fā)現(xiàn)，茵茵的頭上又長出了一對貓耳朵……這實在是太不可思議了！楓玲和櫻玲的呼吸急促起來了，下意識的咽了一口唾沫，正在這是，茵茵居然變成了一只白色的小貓，一溜煙跑出了教室……</p> <p> 太不可思議了！ 太不可思議了！她們打了一個寒顫，這時，她們的腳竟然不聽使喚了，像著了魔似的從座上站了起了，去追茵茵。這時，老師已經(jīng)來了，可老師和全班同學(xué)就像沒?(?_?)?看(o)見一樣……</p> <p> 楓玲和櫻玲一直在后面追茵茵，突然，她們看見，茵茵跑進(jìn)了那個學(xué)校一直緊鎖著的一個老式的辦公室，奇怪的是今天，這個教室的門竟然是打開著的！她們也跟了上去……可是，當(dāng)她們走進(jìn)去的那一刻，頓時，發(fā)生了天旋地轉(zhuǎn)的變化——這里變成了一片幽深的森林！楓玲和櫻玲嚇的直起雞皮疙瘩。</p> <p> 還是楓玲的眼睛好，她發(fā)現(xiàn)，在不遠(yuǎn)處，站著一個女孩“( o )啊！是茵茵！”楓玲拉著櫻玲跑了過去。</p> <p> 茵茵一看見楓玲和櫻玲就對她們說：“我?guī)銈內(nèi)ヒ粋€地方。”她拉著楓玲和櫻玲就向一個大打的蘑菇房跑去。櫻玲把茵茵拉住，問她：“你把我們帶到(=@__@=)哪里去( o )啊？”“去見魔法王國的智者——年爺爺。”“年爺爺！？”楓玲和櫻玲異口同聲道。“( o )是的。”“什么黏爺爺，我還膠水奶奶呢(o)！茵茵，我的好(^o^)/~茵茵，你帶我們回去嘛！”櫻玲又開始撒嬌了。可是誰知茵茵不吃櫻玲這一套，硬是要拉她們?nèi)ヒ娛裁茨隊敔敗?/p> <p> 她們走進(jìn)了那個蘑菇房，在里面坐著一個年邁的老爺爺。“年爺爺好！”三個人 異口同聲道，不不不，應(yīng)該是“三”口同聲，(*^__^*) 嘻嘻……“年爺爺，你把她們倆的DNA和兩位公主的DNA校（jiao）對一下吧！”“嗯，好。”“楓玲、櫻玲你們放下1000000000顆心，年爺爺是不會傷害你們的。”“真的嗎？”櫻玲天真的問。“我相信。”楓玲說。“既然我姐姐相信，那我也相信。”櫻玲膽怯地說。“那楓玲、櫻玲你們過來吧，我們開始驗證。”</p> <p> {驗證后}</p> <p> “茵茵，你過來一下。”“(o)哦！”“茵茵你的任務(wù)完成，你的下一個任務(wù)是：教二位公主學(xué)會她們的魔法。”“是。”</p> <p> 楓玲和櫻玲出來了，茵茵和年爺爺就跪下說：“參見二位公主。”楓玲和櫻玲傻了不知的他們在說什么。“二位公主，一會兒讓茵茵告訴你們吧！”年爺爺說。</p> <p> “年爺爺那我們先走了。”楓玲說。</p> <p> “年爺爺，再見！”</p> <p> “嗯，好。再見！”</p> <h2>第8篇：爺爺?shù)拇竽⒐椒段?/h2> <p>今天，森林里非常熱鬧，原來森林里要舉行第三屆運動會比賽。比賽的地方到處插著五彩的旗子，動物們都等待著好戲的開始，連平常不喜歡出門的笨狗熊也來助威。比賽的項目有很多：跳水、踢球、游泳等等，然而最引人注意的還是龜兔賽跑了。說到這兒，你可能還要問：“龜兔不是賽跑過兩次了，怎么還賽？“原來是這樣，在第二次賽跑時，烏龜用推進(jìn)器贏了小白兔，可是小白兔不服氣，于是找鳥爺爺出主意，鳥爺爺對他說：“你可以約烏龜再跑一次呀！“小白兔聽了馬上來到烏龜家，再次向他挑戰(zhàn)，烏龜二話沒說答應(yīng)了。</p> <p> 比賽開始了，猴裁判提高聲音說：“現(xiàn)在各就各位，比賽開始！“只聽“砰“的一聲槍響，小白兔像離弦的箭，穿梭似的向前跑去，他望了望還停在綜點的烏龜，開心的笑了笑，心想：這次我這個“飛毛腿“絕對不能在慢悠悠的小烏龜面前丟臉了，他越想越得意，使出全身的力氣評命向前跑。而小烏龜卻不緊不慢的往自己殼上插上一對翅膀，在空中飛起來，比過了天上的神仙。小白兔見此狀況，急忙開上汽車，可怎么也趕不上烏龜，急的滿頭大汗。烏龜在空中邊飛邊說：“兔老弟，加油呀！“兔子聽了這話更不知如何是好，結(jié)果烏龜贏了兔子，動物們都像烏龜祝賀。</p> <p> 比賽結(jié)束了，小白兔舉著它的蘑菇傘不高興的走回家，忽然一會兒下起了大雨，小白兔趕緊跑回家，忽然看見烏龜和金黃的大獎杯，小白兔趕緊把蘑菇傘給他們大上，烏龜伸出頭問：“那你怎么辦？“小白兔說：“沒事，我回家換上黑制服就行了！“過了一會兒，雨停了，太陽出來了，望著他們開心的樣子，太陽笑了。</p> <p> 小朋友，聽了龜兔賽跑的故事，我們應(yīng)該像他們學(xué)習(xí)什么呢？</p> <p></p> <h2>第9篇：爺爺?shù)拇竽⒐椒段?/h2> <p> 1、選擇加點字正確的讀音畫“√”。(4分)</p> <p> (1)爺爺正在睡覺(jué jiào)，你不要大聲講話。</p> <p> (2)最近小明的學(xué)習(xí)成績有了較大的提高，我發(fā)覺(jué jiào)他的自信心也增強了。</p> <p> (3)我發(fā)(fā fà)現(xiàn)奶奶的頭上又增添了幾根白發(fā)(fā fà)。</p> <p> 2、我會拼，也會寫。(16分)</p> <p> 3、我會填。(6分)</p> <p> zuò ( )下 ( )位 ( )事</p> <p> fēng ( )雨 蜜( ) 山( )</p> <p> 4、我會認(rèn)，也會組詞。(8分)</p> <p> 5、我會選，也會連。(6分)</p> <p> (1)下面的音序排列正確的一組是( )</p> <p> A. K N Q T X Z B. A C E G L I</p> <p> C. B D F K H J D. G M Q W U X</p> <p> (2)選詞填空</p> <p> 整潔 清潔 潔白</p> <p> ①姐姐的房間又( )又明亮。</p> <p> ②天鵝長著一身( )的羽毛。</p> <p> 鮮花 鮮艷 新鮮</p> <p> ③這里的空氣很( )。</p> <p> ④( )的五星紅旗，高高地飄揚在廣場上空。</p> <p> ⑤公園里( )盛開，美麗極了。</p> <p> (3)讀一讀，連一連。(6分)</p> <p> 坐 衣服 彎彎的 露珠 窄 熱</p> <p> 升 飛機 蒙蒙的 小路 冷 寬</p> <p> 聽 廣播 晶瑩的 春風(fēng) 保護(hù) 破壞</p> <p> 穿 國旗 溫暖的 細(xì)雨 危險 安全</p> <p> 6.我會照樣子把括號中的詞語加到前邊的句子中去。(8分)</p> <p> 例：大熊貓真可愛。(胖乎乎的) 胖乎乎的大熊貓真可愛。</p> <p> (1)爸爸學(xué)習(xí)外語。(在燈下 認(rèn)真地)</p> <p> (2)早晨，太陽升起來了。(火紅的 從東方)</p> <p> (3)河水倒映著樹。(清清的 綠綠的)</p> <p> (4)下課了，我們做游戲。(在操場上 高高興興地)</p> <p> 二、積累•閱讀。(36分)</p> <p> 1、我能把詞語補充完整。(8分)</p> <p> 燈光( )( ) 群山( )( ) 名勝( )( )</p> <p> ( )( )不息 ( )( )秀麗 金碧( )( )</p> <p> 我知道的四字詞語還有：________________、______________。</p> <p> 2、我會補充諺語、古詩。(6分)</p> <p> (1)“籬落疏疏一徑深，__________________。”這句古詩摘自南宋詩人_____________寫的《宿新市徐公店》。</p> <p> (2)誠心____________________，實意_________________。</p> <p> 3、我能按課文內(nèi)容把詞語寶寶送回家。(3分)</p> <p> 年邁的大娘 灑下的汗滴 晶瑩的露珠</p> <p> 小路說：“昨天，他曾路過這里，背著_________________，踏著路上的荊</p> <p> 棘。瞧，那花瓣上______________就是他________________。</p> <p> 4、我會閱讀短文，回答問題。(14分)</p> <p> 小紅傘</p> <p> 有一天，小白兔挎(kuà)著一只籃子，帶著一把小紅傘出門采蘑菇</p> <p> (mó ɡu)去了。</p> <p> 小白兔來到果園里，看見小刺猬怎么也摘不到樹上的果子，她就用自己的小紅傘幫小刺猬把又鮮又嫩的果子鉤下來，小刺猬連聲道謝。</p> <p> 小白兔走到一片蘑菇地里，那兒的蘑菇鮮嫩誘(yòu)人，她剛想去采，忽然看見一只大灰狼正朝這邊走來，逃跑是來不及了，怎么辦呢?小白兔靈機一動，連忙撐(chēnɡ)開小紅傘，小紅傘成了一個可愛的小蘑菇。大灰狼沒看見小白兔，就走過去了。</p> <p> 小白兔舒了一口氣，心想，總算躲過了危險。她高興地采起了蘑菇。這</p> <p> 時天下起了小雨，小白兔打開小紅傘，高高興興地回家了。</p> <p> (1)這篇文章共有( )個自然段。(1分)</p> <p> (2)請照例子寫詞語。(4分)</p> <p> 又鮮又嫩 又___又____ 又____又____</p> <p> 高高興興(AABB) ____________ _____________</p> <p> (3)在括號里填上合適的詞。(4分)</p> <p> 一( )雨傘 一( )籃子</p> <p> 一( )兔子 一( )蘑菇地</p> <p> (4)小白兔的小紅傘用處可大了：它可以___________________，可以幫小白兔躲過大灰狼，還可以_____________________。(3分)</p> <p> (5)讀了短文，我覺得這是一只______________的小白兔。(2分)</p> </div>
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